超微量分光光度計(jì)之所以能檢測(cè)微量樣品的原液,而無需稀釋,是因?yàn)榭梢酝ㄟ^調(diào)節(jié)液滴的光程,從而進(jìn)行了“光程稀釋“的作用。光程越小,可檢測(cè)的樣品濃度越高。這一過程可通過液柱、液膜等形式實(shí)現(xiàn),設(shè)備具有一個(gè)關(guān)鍵部件,叫做”光程調(diào)節(jié)器“,下面是四種較常見的方式及維護(hù)注意事項(xiàng),以供大家參考。
1、旋轉(zhuǎn)升降式光程調(diào)節(jié)器:
對(duì)應(yīng)檢測(cè)方法為樣品拉伸法。一般可切換4-5個(gè)光程,通過底部螺紋結(jié)構(gòu)的調(diào)節(jié)器上升或下降調(diào)節(jié)液柱高度,即光程。由于光程的調(diào)節(jié)通過步進(jìn)式的馬達(dá)電機(jī)控制,因此在頻繁使用過程中可能出現(xiàn)步進(jìn)誤差或機(jī)械磨損??赏ㄟ^定期校準(zhǔn)、調(diào)整的方式,修復(fù)偏差。超微量分光光度計(jì)在經(jīng)過定期(通常為6-12個(gè)月)校準(zhǔn)、調(diào)整之后,可符合各個(gè)光程的精度要求。此類切換器可封閉在樣品臺(tái)下方,具有防塵設(shè)計(jì)。
2、電磁切換式光程調(diào)節(jié)器:
對(duì)應(yīng)檢測(cè)方法為樣品壓縮法。通常可切換2個(gè)光程,通過金屬彈片在兩個(gè)固定位之間通過電磁彈射切換,使液膜的厚度改變,即光程改變。此結(jié)構(gòu)由于沒有“中間位置“,因此無步進(jìn)誤差或轉(zhuǎn)動(dòng)導(dǎo)致的機(jī)械磨損問題,無需定期進(jìn)行超微量分光光度計(jì)光程的校準(zhǔn)、調(diào)整。通常,此類切換器可封閉在樣品臺(tái)下方,具有防塵設(shè)計(jì)。
3、機(jī)械移動(dòng)式光程調(diào)節(jié)器
對(duì)應(yīng)檢測(cè)方法為樣品液柱法。通??汕袚Q2-5個(gè)光程,通過下部元件一定的機(jī)械結(jié)構(gòu)運(yùn)動(dòng),如轉(zhuǎn)動(dòng),使上部元件進(jìn)行高低切換,使液柱的高度改變,調(diào)節(jié)光程。此結(jié)構(gòu)是否需要調(diào)整,取決于下部元件的設(shè)計(jì),如為馬達(dá)等部件,則需要校準(zhǔn)。值得注意的是,此類切換器的上部原件暴露在外,需要注意清潔,避免灰塵及紙屑落入夾縫,否則將導(dǎo)致超微量分光光度計(jì)光程的較大偏差。
4、固定式(不可調(diào)節(jié))
對(duì)應(yīng)檢測(cè)方法為樣品池法或樣品拉伸法。屬于單光程無法切換,因此也不涉及校準(zhǔn)問題。但樣品濃度范圍將受到較大限制。同時(shí),由于樣品池暴露在外,需要特別注意清潔,尤其是金屬探針的下方,容易有樣品殘留且無法有效擦拭。
有的客戶使用超微量分光光度計(jì)進(jìn)行核酸、蛋白定量,獲得一個(gè)大致濃度即可;而有的客戶是需要獲得準(zhǔn)確的數(shù)據(jù)。因此,根據(jù)使用需求的不同,充分了解儀器獲得準(zhǔn)確結(jié)果的條件,是十分必要的。